您好!欢迎访问国联质检食品检测项目中心! 收藏本站 | 设为首页常见问题走进国联联系我们

联系国联质检

  • 24小时服务热线:4008004990
  • 投诉电话:029-68627091
  • E-mail:xaunqd@126.com
  • 地址:西安市西咸新区沣东新城红光大道协同创新港8号楼

您当前所在的位置:首页 > 食品检测 > 毒理病理 > 致畸试验

致畸试验

来源:网络转摘   访问人次:758

新葡京线上投注 www.hongmeitv.com   致畸试验

  Teratogenicity Test


致畸试验,致畸实验


  1范围

  本规范规定了动物致崎试验的基本原则,要求和方法。

  本规范用于检测化妆品原料的致畸性。

  2规范性引用义件

  OECD Guidelines for Testing of Chemicals 食品安全性毒理学评价程序(GB15193.14—94)。

  3试验目的

  检测妊娠动物接触化妆品原料后引起胎鼠畸形的可能性。

  4定义

  致崎性:能在胚胎发育期引起胎鼠永久性结构和功能异常的化学物质特性。

      5试验基本原则

  在胚胎发育的器官形成期给妊娠动物染毒,在胎鼠山生前将妊娠动物处死,取山胎鼠检査其骨骼和内脏崎形。

  6试验方法 

      6.1试剂

  6.1.1茜素红溶液:茜素红0.1g,氧氧化钾10g,蒸馈水1000mL。

  6.1.2透明液A:甘油200mL,氢氧化钾10g蒸馈水790mL.

  6.1.3透明液B:甘油与蒸馏水等量混合。

  6.1.4同定液(Bouins):苦味酸饱和液75份,甲醛20份,冰醋酸5份。

       6.2实验动物和饲养环境

  动物选枰:首选为健康的性成熟大鼠。

  实验动物及实验动物房应符合国家相应规定。

  6.3剂量和分组:至少设三个剂量组,最高剂量应能引起母鼠某些些毒性反应,但不应引起10% 以上动物的死亡。最低剂量不会出现可观察到的毒性反应。另设阴性对照组。当初次进行致 崎试验或使用新的动物种属和品系时,必须同时设阳性对照组,阳性对照物可选用敌枯双、维生素A等。

  6.4试验步骤

  6.4.1 “孕鼠的检出和给受试物吋间:雌鼠和雄鼠按1: 1 (2: 1)同笼,每日晨观察阴

  栓(或阴道涂片),査山阴栓(或精子)的当天定为孕期零天。如果5 d内没査山受精鼠, 应调换雌鼠。检出的受精鼠按随机分组。在孕期6d-15d,每天经口给予受试物。孕鼠于孕期0、6、10、1520 d称重,并根掘体重调整给受试物量。

  6.4.2孕鼠处死和一般检査:人鼠于妊娠第20 d处死。剖腹检査卵巢内黄体数,取出子宮, 称重;检査活胎、早期吸收和死胎数。

  6.4.3活胎鼠检査

  逐一记录胎鼠体重、体长:、尾长、检査胎鼠外观有无异常,如头部有尤脑膨出、露脑、 小头、小耳、小眼、无眼和睁眼、兔唇、下颌裂,躯干部有无腹壁裂、脐疝、脊柱弯曲,四 肢有尤小肢、短肢、并趾、多趾、无趾,崎形,尾部有无短尾、卷尾、无尾、肛门有无闭锁。

       6.4.4胎鼠骨标本的制作与检査

  将每窝2/3的活胎鼠放入95% (V/V)乙醇屮固定2周?3周,取出胎仔(或可去皮、去内 脏及脂肪)流水冲洗数分钟后放入lg?2g/100 mL的氢氧化钾溶液内(至少5倍于胎仔体积) 8h~72h,透明后放入茜素红应用液屮染色6h?48h,并轻摇1?2/d,至头骨染红为宜。再放入透明液A1d~2d,放入透明液B2d?3d,待骨骼染红而软组织基本褪色,将标本放入小 平皿中,用透射光源,在休视显微镜下作整体观察,然后逐少检査骨骼。测量囟门大小,矢状缝的宽度,头顶间骨及后头骨缺损情况,然后检査胸骨的数目,缺失或融合(胸骨为6个, 骨化不全时首先缺第5胸骨、次为缺第2胸骨)。肋骨通常12?13对,常见崎形有融合肋、分叉肋、波状肋、短肋、多肋、缺肋、肋骨中断。脊柱发育和椎体数目  (颈椎7个,胸椎12?13 个,腰椎5?6个,底椎4个,尾椎3-5),有无融合、纵裂等。最后检査四肢骨。

  6.4.5胎鼠内脏检査

  每窝的1/3胎鼠故入Bouins液中,固定两周后作内脏检査。先用自来水冲去固定液,将鼠仰放在石蜡板上,剪去四肢和尾,用刀片从头部到尾部逐段横切或纵切。按不同部位的断面观察器官的人小、形状和相对位置。

  (1) 经口从舌与叫口角向枕部横切(切面1),观察人脑、间脑、延髓、舌及腭裂。

  (2) 在眼前面作垂纵切(切面2),可见鼻部。

  (3) 从头部垂直通过眼球中央作纵切(切面3)。

  (4) 沿头部最大横位处穿过作横切(切面4)。

  以上切面的目的可观察舌裂、颚裂、眼球崎形、脑和脑室异常。

  (5) 沿下颚水平通过颈部中部作横切(切面5),可观察气管、食管和延脑或脊髓。 以后自腹中线剪开胸、腹腔,依次检査心、肺、横膈膜、肝、胃、肠等脏器的人小、位置,査毕将其摘除,再检査肾脏、输尿管、膀胱、子宫或睾丸位置及发育情况。然后将肾脏切开,观察有无肾盂积水与扩大。

  6.5统计方法及结果评定

  各种率的检査用X2检验,孕鼠增重用方差分析或非参数统计,胎鼠身长、体重、窝平均活胎数用T检验。结果应能得出受试物是否有母体毒性和胚胎毐性、致崎性,最好能得出最 小致畸剂量。

  为比较不同有害物质的致畸强度,可计算致崎指数,以致畸指数10以下为不致崎,10?100 为致畸,100以上为强致畸。为表示有害物对人体危害的人小,可计算致畸危害指数,如指数大于300说明受试物对人危害小,100-300为中等,小于100为危害人。

  致畸指数 = 雌鼠LD50  /最小致畸剂量

      致畸危害指数 = 最大不致畸剂量 / 最大可能摄入量

  7试验报告

  试验报告应包括下列内容:

  (1) 受试物名称、理化性状、配制方法、染毒剂量;

  (2) 动物种属、品系、来源(注明合格证号和动物级别)、体重;

  (3) 实验动物饲养环境,包括饲料来源、室温、相对湿度、实验动物房合格证号;

  (4) 试验条件和方法;

  (5) 动物出现的毒性反应,发生时间及死亡情况;

  (6) 孕鼠体重增长和妊娠情况;

  (7) 结果:吸收胎和胎仔情况,有否内脏和骨骼崎形以及无作用剂量;

  (8) 结论。

  8 结果解释

        解释致畸试验结果时,必须注意种属差异。试验结果从动物外推到人的有效性很有限。


  股票代码:837554

  国联使命:让检测还人类绿色生活

  国联价值观:崇尚科学追求真理见证公平

  详情可致电国联质检免费服务热线4008004990或登陆网站新葡京线上投注咨询,我们将为您提供专业的技术支持与服务. 国联质检食品检测中心在线咨询客服。





 

上一篇 没有了下一篇 没有了

检测推荐